HPLC法测定儿茶素

2022-06-27 09:05 上禾生物

HPLC法测定儿茶素

1)试剂

a. 甲醇(色谱纯)b. 冰醋酸(分析纯)c.甲酰胺(分析纯)   b. 重蒸水     

2)仪器

高效液相色谱仪(SHIMADZU)    分析天平(1/10000)   


    超声波清洗仪                    0.45 mm 微孔过滤器       


    50 ml 容量瓶                    带塞小玻璃瓶

3)色谱条件

色谱柱    Shim-pack   ODS C18 5 mm   4.6´150mm

波长     278nm

流动相   A: 水        B: 甲酰胺:甲醇:冰醋酸=40:2:1.5

流速     1.1 ml/min

进样量   10 ml

4)样品制备

(1)待测样品   精确称取30mg提取物于50ml容量瓶中,用水超声溶解,冷却定容,0.45 mm微孔滤膜过滤为供试液。

标样制备   精密称取混合标样用水溶解,使其浓度为0.6mg/ml,过0.45mm滤膜,置冰箱贮存。

5)计算

根据各峰峰面积利用外标法计算各种成份的含量。

样品中各组分的含量%=A1×C×V

                                   A2×W




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